安徽首例克隆羊死亡内情

　　-文/本报记者 吴洣麓 -摄影/本报记者 曲立岩

　　5月8日，世界首例以黄淮白山羊作为受体卵来源和代孕受体的克隆波尔山羊在安徽农业大学动物科学院的羊场诞生。8小时之后，这头名为“动八”的属于国内真正意义上的体细胞克隆羊不幸夭折。

　　事件再次引发人们对克隆动物技术安全性的高度关注。5月12日，本报记者探访安农大动物科学院，了解到克隆羊“动八”从孕育到死亡鲜为人知的内幕。

　　代孕母羊难产，人工助产救得“动八”小生命

　　课题组陶勇博士介绍，羊的妊娠期是五个月，也就是150天左右，研究小组是在去年12月5日将克隆胚胎移植到这头代孕母羊体内的，因此研究小组的专家估计5月6日到8日就是预产期。

　　全程参与克隆羊研究和接生过程的动物科技学院研究生韩伟介绍，5月8日下午5点钟左右，产房值班人员发现，代孕母羊出现分娩预兆，很快便开始分娩，为倒生，胎儿很大，母羊出现分娩困难。

　　“当小羊的尾巴露出来，看到波尔山羊尾根处特有的黑色斑点时，大家都很激动，随后，慢慢露出纯白色的身体。经努力助产，终于，7点50分，小羊露出了深棕色的小脑袋，耷拉着两扇芭叶长耳，完全具有典型的波尔山羊的特征，这时在场的所有的人都欢呼起来，大家开始变得特别兴奋。” 韩伟说。

　　当时正在上课的陶勇博士闻讯也立即赶到了产房：“小家伙的体重足足有4公斤，比正常出生的小羊羔大了将近一倍。‘咩’的叫声特别清脆，排尿也很正常，而代孕母羊也表现出强烈的母性行为，爱怜地舔去小羊身上的黏液。”

　　出生1小时后克隆羊出现异常反应，8小时后夭折

　　然而，随着不良征兆的出现，大家兴奋的心又提到了嗓子眼。尽管小羊的个头比较大，但是体质偏弱。半个小时后，科研人员开始帮助小羊吮吸母乳，小羊试图站起来，但是挣扎了好几次都没有成功，科研人员进行了人工哺乳，总共喂了将近80毫升羊乳。

　　一小时后，发现小羊的舌尖颜色发紫，显示出供血不足的症状，心率也一直维持在超出正常水平的160-170次/分钟。

　　“ 一般来说，小羊羔生下来呼吸稍急促是很正常的，随着时间的推移会逐渐变慢，但是一个半小时以后，心跳速度并没有任何下降的迹象，因为克隆羊一般容易出现心肺发育不全的毛病，出现这种情况后，大家担心内脏是否在发育上出现问题。” 陶勇说。

　　在场的所有人都开始紧张起来，立即请来了

　　由于这头克隆波尔山羊诞生于5月8日晚上约8时，体重8斤，存活8小时，牵动八方，又是动物科技学院的重要科技成果，院长章孝荣教授特将其定名为“动八”。

　　解密“动八”孕育过程为真正意义的体细胞克隆

　　记者了解，早在1999年，安徽农业大学动物科学院就已经开始筹备克隆相关工作。

　　2001年，研究小组开始构建克隆胚胎，即是以高度分化的体细胞作为核供体，以体外成熟的卵母细胞作为胞质受体，通过核移植用显微操作的方法重构出胚胎。

　　所谓体细胞是相对生殖细胞而言的，具有个体全部的遗传信息，高度分化的体细胞在功能上已经分化，只具备某一方面的功能，而卵母细胞就是通常所说的卵子，克隆胚胎时需要作“去核”处理，即是除去卵子中的遗传物质。

　　波尔山羊是一种世界公认的非常优秀的肉质山羊。在安农大的羊场饲养着一定数量的波尔山羊。

　　陶勇博士介绍说，他们从波尔山羊的耳朵上获得体细胞，建立体外培养体系，作为供体细胞的来源。同时又从屠宰场获得黄淮白山羊的卵巢，带回实验室，对卵巢上的卵母细胞进行体外成熟培养。然后将体细胞移入去核卵母细胞中，再通过融合和激活，就可以得到克隆胚胎。

　　自2005年的11月起，研究小组陆续获得600余枚波尔山羊克隆胚胎，先后移植了37头受体羊。受体母羊全部都是安徽省地方山羊品种———黄淮白山羊，这也是此次克隆的独特之处。

　　克隆胚胎移植时，先观察受体羊发情时间，再结合腹腔镜检查确定适合胚胎移植的受体羊，采取手术移植法，将克隆胚胎移植到同期发情的代孕母羊的输卵管内。

　　每头受体羊一般移植十几枚克隆胚胎到体内，此次“动八”的代孕母亲体内就被移植了十枚克隆胚胎。

　　不同于胚胎克隆，这头克隆羊属于真正意义上的体细胞克隆，整个克隆过程是没有任何公羊的参与，属于无性克隆，是用已分化的体细胞进行核移植培育出来的个体。

　　-真相

　　“动八”死因初步查明 与克隆技术本身无关

　　动物科技学院动物医学系主任李富宝教授主要负责对克隆羊的解剖，他对记者说，当时重点解剖了心脏和肺，结果发现完全正常，而且其他各个器官都发育正常。但是他们发现克隆羊的心包和胸膜都有些炎症，此外，克隆羊的肋骨从第四到第十个肋骨全部断了，骨折的部位出现明显的淤血。

　　“因此我们分析，这是在助产时造成的机械性损伤。在人工助产过程中，由于护理不当造成7根肋骨骨折，之后引起急性的胸膜炎，然后又激发心包炎，最终导致克隆羊的死亡。”李富宝教授认为，如果当时及时采取剖腹产，克隆羊是肯定能够存活下来的。

　　陶勇也非常后悔，他分析认为，由于孕育本头克隆波尔山羊的代孕母亲是初产羊，加上代孕母羊只产一羔，克隆羔羊明显超重，又是倒生，因此出现难产。在正常情况下，从分娩预兆的出现到真正分娩至少得两三个小时，而这次不到一个小时，时间很短，这给具体操作带来了压力。

　　-专家点评

　　现任生物学院和农业生物技术国家重点实验室副主任，博士生导师。中国独立自主完成的首例细胞克隆猪的课题组领导。

　　李宁：中国克隆技术基础雄厚

　　我国进行克隆的动物最多的是牛，其次是羊，猪、兔子等动物的克隆虽然也有所涉及，但是总的来说不多。一般来说，主要选择高产优质的动物进行克隆，而且选择比较珍贵或者濒临灭绝的动物品种，如中国农大就曾经成功克隆了世界顶级荷斯坦种公牛。

　　虽然我国在体细胞克隆方面的起步较晚，但是拥有非常扎实的克隆技术基础，目前，我国的克隆技术已经与国际先进水平平起平坐了。克隆技术也为有效拯救濒危动物，提供了一种新的思路和方法，从理论上来说，在条件成熟的情况下甚至可将灭绝物种恢复原状。